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人Elisa試劑盒有效儲存法

更新時間：2014-12-11 點(diǎn)擊次數(shù)：1721次

　　人Elisa試劑盒主要的客戶是醫(yī)學(xué)院校，做實行面向的種屬重要是人，大鼠和小鼠，如今市面市情上雞、牛、馬、羊、兔種種指標(biāo)的盒子都有售，真不知道這些抗體是怎么來的。據(jù)我所相識，這些炎癥指標(biāo)依然有很大種屬特異性的。對付一些小分子的檢測，例如：前線腺素、糖皮質(zhì)激素的檢測，我的理解是要用競爭法ELISA去檢測，也要購買采用這個方法的盒試劑盒。ELISA試劑盒一般細(xì)胞因子的檢測，都是采用常規(guī)的夾心法ELISA檢測，由于因子分子量比力大，一般10幾個KD左右，很容易找到兩個或多個抗原表位。

　　已包被抗原或抗體的固相載體在低溫（2~8℃）干燥的條件下一般可保存6個月以上。有些不完整的試盒，人Elisa試劑盒僅供應(yīng)包被用抗原或抗體，檢測人員需自行包被。結(jié)合物即酶標(biāo)記的抗體（或抗原），是ELISA中zui關(guān)鍵的試劑。良好的結(jié)合物應(yīng)該是既保有酶的催化活性，也保持了抗體（或抗原）的免疫活性。結(jié)合物中酶與抗體（或抗原）之間有恰當(dāng)?shù)姆肿颖壤诮Y(jié)合試劑中應(yīng)盡量不含有或少含有游離的（未結(jié)合的）酶或游離的抗體（或抗原）。此外，結(jié)合物尚要有良好的穩(wěn)定性。

　　人Elisa試劑盒的主要作用是提供基本營養(yǎng)物質(zhì)、提供激素和各種生長因子、提供結(jié)合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷、對培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用。Elisa試劑盒也就是指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。下面來說保存Elisa試劑盒的條件與注意事項。

　　1、需要長期保存的人Elisa試劑盒必須儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月.由于Elisa試劑盒結(jié)冰時體積會增加約10%,因此,Elisa試劑盒在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。

　　2、熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已*解凍的人Elisa試劑盒.加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻.此熱處理的目的是使Elisa試劑盒中的補(bǔ)體成分（complement）滅活.除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成Elisa試劑盒沉淀物顯著增多,而且還會影響Elisa試劑盒的質(zhì)量.補(bǔ)體參與反應(yīng)有:細(xì)胞毒作用, 平滑肌細(xì)胞收縮, 肥大細(xì)胞和血小板釋放組胺, 增強(qiáng)吞噬作用, 促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化。

　　3、瓶裝人Elisa試劑盒解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的Elisa試劑盒放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻（小心勿造成氣泡）,使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生.切勿直接將人Elisa試劑盒從-20℃進(jìn)入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀；而小分子很難找到兩個不通的表位，也就決定了包被抗體和檢測抗體無法同時結(jié)合小分子并固相化。解決方案便是酶標(biāo)板上包被二抗，每個孔加入一定量的酶標(biāo)的小分子，然后加樣品，再加不帶標(biāo)志的檢測抗體，顯色底物。樣品的目標(biāo)小分子的含量越高，吸光度越低。

　　人Elisa試劑盒頁面出來大量的商品化的試劑盒，千篇一律的明書時候，我真的是蒙了，我懷疑自己跟不上時代了。我不去評論這些試劑盒的真假，我仍舊建議做這些檢測指標(biāo)的朋友,ELISA檢測方法簡單，靈敏度高，我個人認(rèn)為ELISA檢測人Elisa試劑盒或者培養(yǎng)上清的細(xì)胞因子、胰島素、激素等排泄型的小分子卵白的定量檢測;ELISA試劑盒病原體抗原的定性與定量;評估自己制備的人Elisa試劑盒抗體的效價等。很多客戶有個誤區(qū)，拿來一個指標(biāo)就想當(dāng)然地嘗試用ELISA去檢測，我還是建議多動腦，該檢測活性的檢測活性，

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